NY∕T 3279.2-2018 病毒微生物农药 苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒 第2部分：苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒悬浮剂(农业)
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1.04 |
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17 |
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日期： |
2021-12-24 |
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ICS 65.100,B 17 NY,中华人民共和国农业行业标准,NY/T 3279.2一2018,病毒微生物农药茵宿银纹夜峨核型,多角体病毒第2部分:茵宿银纹夜峨核型,多角体病毒悬浮剂,Viral based insecticides-Autographa californica nucleopolyhedrovirus (AcNPV )Part,2 :Autographa californica nucleopolyhedrovirus suspension concentrate (SC ),2018-07-27 发布2018-12-01 实施,中华人民共和国农业农村部发布,a.&..,目U 吕,NY/T 3279. 2-2018,NY/ T 3279 (( 病毒微生物农药盲宿银纹夜峨核型多角体病毒》分为2 个部分:,-一第1 部分: 茵宿银纹夜峨核型多角体病毒母药;,一一第2 部分: 茵宿银纹夜娥核型多角体病毒悬浮剂,本部分为NY/ T 3 279 的第2 部分,本部分按照GB/ T 1. 1一2009 给出的规则起草,本部分由农业农村部种植业管理司提出并归口,本部分起草单位:农业农村部农药检定所、中国科学院动物研究所、河南省济源白云实业有限公司,本部分主要起草人: 秦启联、王晓军、张寰、郭明程、王红托、程清泉、何静,I,NY/T 3279.2-2018,病毒微生物农药茵蓓银纹夜峨核型多角体病毒,第2 部分:茵蓓银纹夜峨核型多角体病毒悬浮齐,范围,本部分规定了茵宿银纹夜峨,志、标签、包装、储运、安全和,本部分适用于以茵宿,核型多角体病毒悬浮剂,2,下列文件对,件。凡是不注日,GB/ T 160,GB/ T 16,GB/ T 16,GB 3796,GB 4789.,GB 6682,GB/ T 81,GB/ T 1,GB/ T 161,GB 20813,GB/ T 28137,GB/ T 31737,3 术语和定义,4,下列术语和定义适用,3. 1,茵蓓银纹夜蜡核型多角,pension concentrate (SC),、产品的检验与验收以及标,以茵稽银纹夜峨核型多角体病毒母药与适宜的载体及分散剂混合均匀的液体制剂,3. 2,病毒包酒体polyhedral inclusion body( Pffi),病毒水平传播的主要载体形式，其结构特征是病毒粒子包埋于蛋白质基质的多角体中,3. 3,生测效价比potency ratio,根据药物的药理和对生物体的作用设计试验，比较样品、标准品引起的生物反应，测定药物效价或,其生物学活性,3. 4,1,NY/T 3279. 2-2018,菌落形成单位colony fonning units(CFU),由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落。指在琼脂平板上经过,一定温度和时间培养后形成的每一个菌落，是计算细菌或霉菌数目的单位,3. 5,杂菌菌落总数number of microbial contaminants,将盲稽银纹夜峨核型多角体病毒悬浮剂样品稀释后涂布在琼脂营养培养基上，所得到的微生物(真,菌和细菌)菌落数之和,4 要求,4. 1 外观,应是可流动、易测量体积的悬浮液体;存放过程中可能出现沉淀，摇匀应恢复原状，不应有结块,4.2 指标,茵宿银纹夜峨核型多角体病毒悬浮剂还应符合表l 的要求,表1 茵蓓银纹夜峨核型多角体病毒悬浮剂控制项目指标,项目指标,病毒包涵体数量， PIB/ mL 二三标刁可值,生测效价比(标准品LCso/ 待测样品LCso ) ， % 二注80 .0,杂菌菌落总数， CFU/ mL ζ1. 0 X 10 7,pH 5. 0-7. 5,悬浮率， % 三，， 8 0.0,细度(通过75μ口标准筛)， % 二主95 .0,倾倒性,倾倒后残余物， % ~3 .0,洗涤后残余物， % ~O . 5,持久起泡量(1 min 后) ， mL ~3 0.0,5 试验方法,5. 1 一般规定,除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，所述溶液均为水溶液，试验用水为GB/ T 6682 中规定,的三级水,5. 2 抽样,按照GB/ T 1605 中"液体制剂采样"方法进行。用随机数表法确定抽样的包装件，最终抽样量应不,少于200 mL ,5. 3 毒种鉴别,5. 3. 1 病毒毒种的分子鉴定,首宿银纹夜峨核型多角体病毒毒种的鉴定，采用PCR 扩增及DNA 测序分子鉴定的方法。通过提,取试样中病毒DNA 作为模板，用AcNPV 的ie - 1 基因、helicase 基因和gp64 基因的特异性引物分别,进行PCR 扩增反应，琼脂糖凝胶电泳检测。当PCR 扩增片段大小约为1 kb 或300 bp 时，回收扩增片,段，并克隆到T 载体上，用M13 通用引物对克隆后的PCR 产物进行测序，将测序结果分别与AcNPV,(E2 株〉的ie - 1 基因、helicase 基因及gρ64 基因进行比对分析，两者序列一致性均应该大于98 % ，即认,定试样中含有茵宿银纹夜峨核型多角体病毒,茵稽银纹夜峨核型多角体病毒有效成分描述参见附录A。首稽银纹夜峨核型多角体病毒毒种的分,子鉴定方法按照附录B 的规定,5. 3. 2 病毒毒种的生物测定鉴别,NY/T 3279. 2-2018,生物测定的方法作为茵宿银纹夜峨核型多角体病毒毒种分子鉴定的补充。分别对粉纹夜峨、甜菜,夜娥和家蚕3 种昆虫幼虫进行生物测定。粉纹夜娥和甜菜夜峨感病症状:虫体体色粉白，体节膨大，行,动缓慢，甚至液化而亡，其感病特征非常明显。而家蚕的校正死亡率应小于2……
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